Вверх
ТЕЛЕФОН: (343) 317-57-90
ЛИЧНЫЙ САЙТ УРОЛОГА-АНДРОЛОГА

Что такое методы молекулярной диагностики?



Успехи в исследовании генома человека привели к созданию ряда новых медицинских направлений. Уже никого не удивляют фразы «Генетическое разнообразие человека», «Функциональная геномика», «Этические, правовые и социальные аспекты исследований генома человека».Фото к статье Методы молекулярной диагностики

«Генетизация» медицина произвела революционный переворот в изучении наследственных болезней, сложных инфекционных заболеваний, внедрению молекулярно-генетических технологий в медицине.

Что дала миру молекулярная медицина?

Хорошо известны практические достижения молекулярной медицины, напрямую связанные с широким внедрением новых молекулярных технологий для решения медицинских задач:

  • созданы уникальные методы молекулярной диагностики;
  • появилась геномная дактилоскопия, предиктивная медицина (предсказательная);
  • созданы фармакогеномика и генотерапия.

Характерными особенностями всего направления молекулярной медицины являются:

  • индивидуальный подход к больному, который гарантируют молекулярно генетические методы диагностики;
  • уникальный выбор стратегии профилактики, лечения больных, основывающиеся на генетических особенностях и уникальности каждого субъекта;
  • предупредительный (предиктивный) характер молекулярной медицины, поскольку профилактика и лечение может начинаться заблаговременно, до появления реальной клинической картины патологического процесса.

Общие сведения о молекулярной диагностике

Локализация и клонирование существующих последовательностей кДНК генов (комплементарных, синтезированных) предоставляет медикам принципиально новые возможности в диагностике наследственных заболеваний.

Используемые методы молекулярной диагностики позволяют исследовать различные формы одного и того же гена, образовавшиеся в результате мутации, как у самих пациентов, так и членов их семей. Исследованию могут быть подвергнуты и предполагаемые гетерозиготные носители патологических мутаций (пациенты, в потомстве которых четко видно расщепление признаков).

Молекулярная диагностика широко применяется в перинатальной практике, поскольку исследования с использованием молекулярных методов анализа проводятся на самой ранней стадии развития плода.

Точная и ранняя диагностика дает возможность выявить патологию до появления биохимических и клинических симптомов болезни. Досимптоматическая диагностика позволяет разработать тактику лечения, начать проведение упреждающей терапии.

Кроме того, молекулярно-генетический анализ позволяет эффективно выявить гетерозиготных носителей в семьях высокого риска, что стало важным фактором своевременной и эффективной профилактики наследственных болезней.

Несомненными преимуществами молекулярного медицинского анализа являются:

  • универсальность;
  • возможность использовать в исследованиях любые ДНК-содержащие ткани или клетки, причем анализ может быть произведен на любых стадиях индивидуального развития организма (онтогенеза), хоть с момента оплодотворения.

Этапы и варианты молекулярной диагностики

Молекулярно-генетические методы диагностики - это большая группа методов, предназначенных для определения вариаций в структуре изучаемого участка ДНК (аллеля, гена, региона хромосомы). Современные технологии позволяют даже расшифровать последовательность оснований.

В основу данных методов положены манипуляции, выполняемые с ДНК и РНК, а именно:

  1. Получение образцов ДНК либо РНК, что является начальным этапом исследований, что осуществляется:

    • путем выделения всей ДНК (тотальной или геномной) из предоставленного для анализа клеточного материала;
    • накопление определенных фрагментов, которые должны быть использованы в последующем анализе.
  2. Ферментативное разделение сложных цепочек дезоксирибонуклеиновой кислоты на отдельные фрагменты, представляющие из себя последовательность нуклеотидов различного размера (рестрикция ДНК) - является необходимым этапом в молекулярно-генетической диагностике.
  3. Электрофорез фрагментов ДНК, благодаря чему достигается разделение фрагментов для последующего исследования.
  4. Визуализация и идентификация фрагментов ДНК.

Диагностика инфекций молекулярно-генетическими методами

Своеобразной революцией в молекулярной диагностике стала разработка технологии полимеразной цепной реакции. Принцип ПЦР метода заключается в многократном удвоение ДНК/РНК, осуществляемом в лаборатории с помощью ферментов. Таким образом, образуется достаточное количество исследуемого материала для визуального анализа.

При проведении ПЦР - сущность метода позволяет копировать лишь участки ДНК/РНК, соответствующие заранее заданным параметрам, становится доступным не только высокоточная диагностика наследственных болезней.

Диагностика инфекций методом ПЦР позволяет выявить на ранней стадии:

  • ВИЧ-инфекцию и гепатиты А, В, С, G;
  • вирус герпеса, 1 и 2 типов;
  • мононуклеоз и цитомегаловирусную инфекцию;
  • туберкулез;
  • онкогенные вирусы (папиллома);
  • листериоз, кандидоз, боррелиоз;
  • инфекции, передающиеся половым путем (хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз);
  • клещевой энцефалит; хеликобактерную инфекцию.

Для диагностики хламидиоза широко применяется также метод лигазной цепной реакции (ЛЦР). В этом случае используется способность ДНК-лигаз восстанавливать фосфодиэфирные связи в одноцепочечных разрывах двухцепочечных молекул ДНК.

Метод лигазной цепной реакции широко используется при анализе урогенитальных, эндоцервикальных образцов. Особенно эффективен этот метод для выявления хламидиоза в моче у женщин. Надежность диагностики очень высокая, до 99%.

Добавить комментарий